ANTYSTREPTOLIZYNA O: KWANTYFIKACJA, UZASADNIENIE, TECHNIKA, PATOLOGIE - BIOLOGIA - 2025

O ASO jest przeciwciało generowane w odpowiedzi na infekcję spowodowaną przez Streptococcus pyogenes, Streptococcus znane także jako P-hemolitycznej A. Ta grupa wytwarza dwa egzotoksyny z hemolitycznej POŁĄCZEŃ AKTYWNOŚĆ streptolizyna „S” i „o” .

Streptolizyna S jest odpowiedzialna za hemolizę beta, która zachodzi w agarze z krwią i chociaż jest toksyczna dla niektórych komórek układu odpornościowego, nie jest antygenowa. Natomiast streptolizyna O, będąc labilna na tlen, jest odpowiedzialna za hemolizę, która zachodzi pod agarem z krwią i jest antygenowa.

Streptococcus pyogenes / Diagram przedstawiający przebieg testu ASTO (reakcja aglutynacji). (Przeciwciała związane z cząstkami lateksu, które zawierają określony antygen). Źródło: Użytkownik: Graham Beards / Alejandro Porto

Dlatego, gdy komórki układu odpornościowego wchodzą w interakcję ze streptolizyną O, powstaje specyficzna odpowiedź immunologiczna, która generuje aktywację limfocytów B. Komórki te wytwarzają przeciwciała skierowane przeciwko streptolizynie O. Dlatego przeciwciała nazywane są antystreptolizyna O.

Streptococcus pyogenes wywołuje różne patologie, między innymi: zapalenie migdałków, różę, liszajec, gorączkę połogową, szkarlatynę i posocznicę. Przeciwciała przeciwko streptolizynie O pojawiają się od 8 do 30 dni po rozpoczęciu infekcji.

Większość z tych infekcji jest bardzo powszechna w populacji, więc ludzie często mają we krwi przeciwciała antystreptolizyny O. Niskie miana wskazują na infekcję tą bakterią w przeszłości, ale wysokie lub rosnące miano wskazuje na niedawną lub trwającą infekcję.

Oznaczanie ilościowe przeciwciał antystreptolizyny O

W laboratorium miano przeciwciał przeciw streptolizynie „O” można zmierzyć za pomocą testu serologicznego. Test antystreptolizyny O (ASTO) opiera się na reakcji aglutynacji z lateksem.

Można to zrobić półilościowo, raportować w postaci krzyżyków lub miano można również określić ilościowo. Znalezienie wartości do 200 IU / ml lub jednostek Todda / ml jest normalne i nieistotne. Powyżej tej wartości jest uważany za pozytywny i istotny klinicznie.

Ten test nie wymaga, aby pacjent był na czczo. Surowica jest używana jako próbka, to znaczy krew pacjenta jest pobierana i umieszczana w probówce bez antykoagulantu, a następnie odwirowywana w celu uzyskania surowicy.

Podstawy techniki ASTO

Technika wykorzystuje cząsteczki lateksu jako podporę do wiązania antygenu streptolizyny O. Zaabsorbowane cząsteczki antygenu reagują z surowicą pacjenta. Jeśli pacjent ma przeciwciało antystreptolizyny O, będą one wiązać się z antygenem przyłączonym do cząsteczki lateksu.

To wiązanie powoduje aglutynację, która jest widoczna makroskopowo. Intensywność reakcji jest wprost proporcjonalna do stężenia obecnych przeciwciał.

Techniki

- Technika półilościowa

Intensywność reakcji można określić częściowo ilościowo za pomocą krzyżyków. W tym celu należy pobrać i umieścić serologiczną płytkę reakcyjną:

50 µl surowicy i 50 µl odczynnika ASTO. Dobrze wymieszaj drewnianą wykałaczką i umieść w automatycznym mikserze na 2 minuty. Przestrzegać. Jeśli automatyczny rotator nie jest dostępny, należy to zrobić ręcznie.

Interpretacja

Zawieszenie bez grudek (jednolite): negatywne

1. + = słaba reakcja

2. ++ = lekka reakcja

3. +++ = umiarkowana reakcja

4. ++++ = silna reakcja

Surowice, które są pozytywne z 3 i 4 krzyżówkami można określić ilościowo.

- Technika ilościowa

W celu oznaczenia ilościowego miana wykonuje się seryjne rozcieńczenia 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Aby to zrobić, należy postępować w następujący sposób: pobrać 4 probówki lub probówki Kahna i na wszystkie nanieść 0,5 ml roztworu soli fizjologicznej. Następnie do pierwszej probówki dodaje się 0,5 ml surowicy pacjenta. Dobrze się miesza. Ta probówka odpowiada rozcieńczeniu 1: 2.

Następnie 0,5 ml przenosi się do probówki 2 i dobrze miesza. Ta probówka odpowiada rozcieńczeniu 1: 4 i tak dalej, aż do osiągnięcia żądanego rozcieńczenia.

Pobrać 50 µl każdego rozcieńczenia i poddać reakcji z 50 µl odczynnika ASTO na płytce aglutynacyjnej, jak wyjaśniono w technice półilościowej.

Interpretacja

Uwzględnia się najwyższe rozcieńczenie, w którym obserwuje się widoczną aglutynację. Obliczenia przeprowadza się w następujący sposób:

ASTO = odwrotność najwyższego dodatniego rozcieńczenia x czułość techniki (stała).

Przykład: Pacjent z pozytywną reakcją do 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml lub Jednostki Todda / ml.

Wartość referencyjna

Normalny dorosły: do 200 IU / ml

Normalne dzieci: do 400 IU / ml

zalecenia

Zaleca się zamontowanie u pacjentów kontroli pozytywnej i negatywnej, aby zapewnić optymalny stan odczynnika. Jeśli kontrola pozytywna nie aglutynuje lub kontrola negatywna nie aglutynuje, odczynnika nie można użyć.

Reakcję należy zinterpretować po 2 minutach, po tym czasie nie jest to ważne, jeśli występuje aglutynacja. To są fałszywe alarmy.

Surowice hiperlipemiczne zakłócają reakcję. Mogą dawać fałszywe alarmy.

Izolowana wartość ASTO nie jest zbyt pomocna. Muszą mu towarzyszyć objawy.

Ponadto w przypadku podejrzenia wystąpienia gorączki reumatycznej lub post-paciorkowcowego zapalenia kłębuszków nerkowych wskazane jest wykonanie co najmniej 2 pomiarów ASTO w celu wykazania wzrostu stężenia antystreptolizyny O i potwierdzenia rozpoznania.

Patologie z wysokim mianem antystreptolizyny O.

Poziom przeciwciał przeciwko streptolizynie wzrasta po wystąpieniu infekcji Streptococcus pyogenes lub ß-hemolitycznej grupy A Streptococcus.

Należą do nich: ostre zapalenie gardła, szkarlatyna, liszajec, róża, poporodowa gorączka i posocznica.

U niektórych pacjentów, którzy niedawno lub nawracali zakażenia paciorkowcami, mogą rozwinąć się choroby autoimmunologiczne jako następstwo lub powikłanie zakażenia popaciorkowcowego, takie jak ostre zapalenie kłębuszków nerkowych i gorączka reumatyczna.

Choroby autoimmunologiczne wywołane przez paciorkowce

Gorączka reumatyczna

Jest to powikłanie lub następstwo zapalne, które może pojawić się od 1 do 5 tygodni po zakażeniu paciorkowcem. Miana antystreptolizyny O znacznie wzrastają 4 do 5 tygodni po wystąpieniu choroby.

Wysokie miano ASTO kieruje rozpoznaniem, ale nie ma związku z ciężkością choroby, a jego obniżenie nie oznacza poprawy.

Przeciwciała antystreptolizyny O reagują krzyżowo z kolagenem i włóknami mięśniowymi, wpływając na niektóre narządy (m.in. serce, skórę, stawy i układ nerwowy).

To powikłanie lub następstwo występuje z zajęciem serca, gorączką, złym samopoczuciem, nie ropnym migrującym zapaleniem wielostawowym, pląsawicą itp.

Ostre kłębuszkowe zapalenie nerek

Ostre kłębuszkowe zapalenie nerek jest nie ropnym następstwem, które występuje w wyniku odkładania się kompleksów antygen-przeciwciało na kłębuszkowej błonie podstawnej.

Tworzenie i krążenie kompleksów antygen-przeciwciało (ag-ac) generowanych przez infekcje paciorkowcami może prowadzić do zmian wysiękowych i zapalenia kłębuszków nerkowych, z białkomoczem i krwiomoczem.

Te kompleksy ag-ac odkładają się w kłębuszkach kłębuszkowych i aktywują kaskadę dopełniacza, powodując uszkodzenie śródbłonka kłębuszkowego. Z tego powodu jest uważana za chorobę autoimmunologiczną, ponieważ układ odpornościowy jednostki uszkadza własne tkanki.

Przeciwciała antystreptolizyny O są bardzo wysokie, a poziomy dopełniacza niskie.

Bibliografia

1. Wiener Laboratories. Lateks ASO. 2000 Dostępne pod adresem: wiener-lab.com.ar
2. Współtwórcy Wikipedii. „Antystreptolizyna O” Wikipedia, wolna encyklopedia. Wikipedia, wolna encyklopedia, 23 stycznia 2019 r. Sieć. 19 Lip.2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Miano antystreptolizyny O w zdrowiu i chorobie: poziomy i znaczenie. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Dostępne w: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Jak stosować miano antystreptolizyny O. Arch Dis Child Educ Practice Ed.2014; 99 (6): 231–8. Dostępne w: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnoza mikrobiologiczna. (Wyd. 5). Argentyna, od redakcji Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Podręcznik mikrobiologii medycznej. 2. wydanie, Wenezuela: Dyrekcja ds. Mediów i publikacji Uniwersytetu w Carabobo.