PĘTLA BAKTERIOLOGICZNA: CHARAKTERYSTYKA, RODZAJE, ZASTOSOWANIA - BIOLOGIA - 2026

Bakteriologiczne pętli jest używany przez urządzenie pracuje mikrobiologami zasiewu kultur mikroorganizmów (bakterii lub grzybów). Jest to prawdopodobnie instrument najczęściej używany przez tych profesjonalistów.

Jego użycie wydaje się proste, ale w rzeczywistości wymaga wielu szkoleń. Przed rozpoczęciem siewu pętlę należy wysterylizować w palniku Bunsena, a następnie pobrać inokulum drobnoustrojów, które może pochodzić z kultury płynnej lub stałej.

Rodzaje pętli bakteriologicznych. Źródło: nie podano autora do odczytu maszynowego. ば や お przyjęto (na podstawie roszczeń dotyczących praw autorskich).

Po pobraniu inokulum można je umieścić w pożywce płynnej lub zaszczepić w pożywce stałej. Po każdym zabiegu pętla jest ponownie sterylizowana. Rączka nadaje się również do wykonywania rozmazów mikrobiologicznych na szkiełku.

Pętla bakteriologiczna ma wiele nazw, w tym: pętla lub pętla platynowa, pętla zaszczepienia lub pętla nasienna, jednak jej prawdziwa nazwa to pętla Kohle.

Materiał, z którego wykonany jest uchwyt, to zazwyczaj stop niklowo-chromowy (nichrom) lub platyna. Inną odmianą dostępną na rynku są plastikowe jednorazowe pętle bakteriologiczne.

Z drugiej strony istnieje kilka rodzajów pętli bakteriologicznych, z których każdy spełnia funkcję w ramach zadań wykonywanych przez mikrobiologa. Wybór uchwytu będzie zależał od tego, co należy zrobić.

Na przykład, aby wykonać prążkowie przez zubożenie w celu wyizolowania mikroorganizmu, stosuje się pętlę platynową, która kończy się zamkniętym pierścieniem, niezależnie od tego, czy jest skalibrowana, czy nie.

Mając na uwadze, że w przypadku zasiania próbki moczu, gdzie ważne jest określenie ilościowe CFU, konieczne jest użycie kalibrowanej pętli. Podobnie, aby zaszczepić testy biochemiczne, które wymagają zasiania przez nakłucie, niezbędna jest pętla igłowa. Ważne jest, aby uchwyt był obsługiwany przez przeszkolony personel.

cechy

Pętle bakteriologiczne składają się z dwóch skrajności. Jeden koniec odpowiada uchwytowi lub podstawie, a drugi samemu uchwytowi.

Podstawa uchwytu lub uchwyt

Podstawa służy do trzymania rękojeści podczas manipulacji. Zwykle jest metalowy, ale ma izolator cieplny, który zapobiega poparzeniu operatora podczas sterylizacji końcówki rączki zapalniczki. Mierzy około 20 cm, chociaż może być dłuższy. Posiada gwint do regulacji rączki.

Uchwyt

Jest to cel funkcjonalny, czyli część, która styka się z mikroorganizmami i pożywką hodowlaną. Składa się z cienkiego drutu włożonego do podstawy.

Uchwyt może być wykonany z nichromu lub platyny, dlatego czasami nazywany jest uchwytem platynowym. Ma około 6,5 cm długości i około 0,20 mm szerokości. Rączka z rączką może mierzyć 26,5 cm. Pomiary mogą się różnić w zależności od producenta.

Rodzaje

Istnieje kilka rodzajów pętli bakteriologicznych, a każda z nich ma określone zastosowanie. Rodzaje rękojeści są następujące: kalibrowana rękojeść w kształcie pierścienia, nieskalibrowana rękojeść w kształcie pierścienia, prosta lub igłowa, łopatka, rękojeść w kształcie litery „L” i rękojeść z ostrym zakończeniem.

Z drugiej strony uchwyty mogą być trwałe lub jednorazowe. Te do stałego użytku są sterylizowane w zapalniczce, są wielokrotnego użytku i bardzo trwałe. Chociaż artykuły jednorazowe są sterylne w fabryce, są używane tylko raz i są wyrzucane.

Aplikacje

Uchwyt pierścieniowy, nieskalibrowany

Jest to najczęściej używany uchwyt w laboratorium mikrobiologicznym. Służy do pobrania inokulum z zawiesiny drobnoustrojów (pożywka płynna) lub części kolonii (pożywka stała) w celu wysiania na innej pożywce hodowlanej, albo w teście biochemicznym, albo w pożywce bardziej wzbogaconej lub selektywnej, w zależności od przypadku. Jest również przydatny do wykonywania rozmazów mikrobiologicznych na szkiełku.

W przypadku tego typu pętli początkowe inokulum może zostać pokryte pasmami. Jest również zaprojektowany tak, że ślizga się gładko po agarze, nie uszkadzając go. Oczywiście wymaga to przeszkolonego personelu do obsługi techniki siewu, stosowania odpowiedniej siły i ruchów, aby uzyskać dobre prążkowanie.

Za pomocą tego uchwytu można wykonywać różne techniki wysiewu. Przykład, podłoże stałe na szalkach Petriego jest zwykle wysiewane przez wyczerpanie (istnieje kilka technik, patrz wideo 1).

Technika ta ma na celu uzyskanie izolowanych kolonii w celu ich zbadania i identyfikacji, zwłaszcza gdy próbka jest bakteryjna, to znaczy kultura nie jest czysta (zawiera więcej niż jeden rodzaj mikroorganizmu).

Zamiast tego, kliny sadzi się prostym zygzakiem, aby uzyskać masę bakterii, która nie jest w tym przypadku konieczna do izolowania kolonii.

Czasami są również używane do pobierania określonych próbek. Na przykład Rojas i wsp. Wykorzystali pętlę bakteriologiczną do zbierania zeskrobanych próbek tkanki pochwy od szczurów.

Pętla bakteriologiczna z końcówką pierścieniową, nieskalibrowana. Źródło: Pixinio.com

Uchwyt w kształcie pierścienia, kalibrowany

Ten uchwyt, jak sama nazwa wskazuje, jest skalibrowany do przyjmowania określonej ilości zawiesiny drobnoustrojów. Jest stosowany, gdy konieczne jest, aby inokulum było zgodne z tym, co jest znormalizowane w sztuce.

Na przykład bardzo często sadzi się kultury moczu. W takim przypadku można zastosować kalibrowaną pętlę 0,01 ml i 0,001 ml.

Należy zauważyć, że skalibrowane uchwyty mają margines błędu, który zmienia się w zależności od kąta, pod jakim pobierana jest próbka, oraz wielkości otworu pojemnika.

Jeśli pętla 0,001 ml zostanie włożona pionowo do pojemnika z małym otworem (≤ 7 mm), pobrana ilość będzie o 50% mniejsza niż pożądana.

Dzieje się tak, ponieważ im mniejsza średnica wylotu pojemnika, tym większe napięcie powierzchniowe, a tym samym siły adhezji pomiędzy (szkło - ciecz). To powoduje, że ładunek cieczy pobierany przez uchwyt jest mniejszy.

Natomiast jeśli jest pobierany pod kątem 45 ° w pojemniku z szerokim otworem (≥ 22 mm), można zebrać 150% więcej niż wymagana ilość. W tym przypadku napięcie powierzchniowe jest niższe i siły kohezji szkło / tworzywo sztuczne maleją, podczas gdy siła kohezji ciecz-ciecz wzrasta.

Z tego powodu w przypadku posiewów moczu czasami preferowane są inne metody oznaczania ilościowego jednostek tworzących kolonie.

Uchwyt prosty lub igłowy

Jest również nazywany uchwytem nici. Służy do zaszczepiania niektórych testów biochemicznych, szczególnie tych, które wymagają zaszczepienia techniką nakłucia. Przykład nośników półstałych, które są przygotowane w formie bloku, takie jak: nośnik SIM, MIO i O / F.

Ponadto, w przypadku MIO i SIM, które oceniają ruchliwość, istotne jest, aby nakłucie wykonać za pomocą pętli igłowej, ponieważ interpretacja dodatniej ruchliwości ma miejsce, gdy bakterie rosną w kierunku boków początkowego inokulum.

Test zaszczepiony pętlą może fałszować wyniki (fałszywie dodatni). Z tego powodu przy tego typu wysiewie należy uważać, aby nakłucie było niepowtarzalne i aby po usunięciu wychodziło w tym samym kierunku, w którym weszło.

Kolejnym testem, który musi być wysiewany igłą, mimo że jest przygotowany w kształcie klina, jest Kligler. W tym teście nie jest zalecane, aby tlen wnikał głęboko w agar, ponieważ do wystąpienia niektórych reakcji chemicznych wymagane jest podłoże ubogie w tlen. Ten uchwyt jest również używany do dotykania określonej kolonii w celu przeprowadzenia subkultury.

Uchwyt szpatułkowy

Większość mikroorganizmów tworzy miękkie, łatwe do zrzucenia kolonie. Istnieją jednak pewne czynniki mikrobiologiczne, których kolonie są twarde i suche, na przykład ogólnie prątki i niektóre grzyby. W takich przypadkach przydatne jest użycie łopatki.

Uchwyt w kształcie litery „L”

Jego najczęstszym zastosowaniem jest brzęczenie kultur grzybów, zwłaszcza pleśni.

Ostry uchwyt końcówki

Jest to przydatne do pobierania bardzo małych kolonii obecnych w kulturach wielu drobnoustrojów, aby móc je subkulturować.

Techniki siewu

Wideo 1

Sterylizacja platynowego uchwytu

Uchwyt należy wysterylizować przed i po użyciu. Aby wysterylizować bakteriologiczną pętlę w zapalniczce, należy postępować w następujący sposób: rączkę należy umieścić w górnej części płomienia, przyjmując możliwie jak najbardziej pionową pozycję, tak aby sterylizować od czubka ku górze.

Kiedy cienkie włókno zmieni kolor na jaskrawoczerwony, można powiedzieć, że jest sterylne. Aby go użyć, jest schładzany i pobierana jest wybrana próbka. (Zobacz wideo 2).

Sterylizacja pętli bakteriologicznej

Wideo 2

Bibliografia

1. „Pętla bakteriologiczna” Wikipedia, wolna encyklopedia. 23 lipca 2019, 13:31 UTC. 18 sierpnia 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrowane uchwyty metalowe dla mikrobiologów: Alternatywa dla produkcji krajowej. Soc. Chodź. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Dostępne pod adresem: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Od redakcji Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnoza mikrobiologiczna. 5th ed. Od redakcji Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, i wsp. Określenie działania przeciwbólowego wyciągu heksanowego z kwiatów Eupatorium arsenei w modelu ostrego bólu u szczurów. mex. nauka. gospodarstwo rolne. 2015; 46 (1): 64–69. Dostępne pod adresem: scielo.org