- Fundament i materiały
- materiały
- Kroki
- Badanie makroskopowe i mikroskopowe
- Oryginalna technika Fausta
- Technika Fausta przez wirowanie
- Korzyść
- Niedogodności
- Bibliografia
Technika Faust to metodologia, która umożliwia koncentrację niektóre jaja i / lub larwy pasożytów znajdujących się w kale pływających. Stosuje się go, gdy bezpośrednie testy koproparazytologiczne są ujemne lub gdy chce się uzyskać czyste próbki wolne od detrytusu.
Istnieją trzy typy metod koncentracji w badaniach koproparazytologicznych: flotacja, sedymentacja lub metody łączące dwie poprzednie. Te metody zwiększają szanse na pozytywne rezultaty.

Analiza stolca.
Metoda Fausta polega na zmieszaniu części próbki kału z substancją gęstszą niż jaja lub pasożyty, które mają być zagęszczane. Powoduje to, że będąc mniej gęstymi unoszą się na powierzchni. Supernatant zbiera się i ogląda pod mikroskopem w celu identyfikacji i kwantyfikacji.
Ta metoda służy do wizualizacji jaj pasożytów. Jednocześnie okazała się bardzo czułą metodą diagnostyki Giardia lamblia, pierwotniaka wiciowatego, który jest szeroko rozpowszechniony na całym świecie. Metody flotacji nie są zalecane w przypadku bardzo ciężkich jaj pasożytów, takich jak tasiemce i przywry.
Pasożyty to jedne z najbardziej rozpowszechnionych infekcji jelitowych na całym świecie, zwłaszcza w biednych krajach o złych warunkach sanitarnych. Z tego powodu posiadanie czułych metod identyfikacji i oceny ilościowej tych pasożytów jest bardzo przydatne w diagnostyce i leczeniu.
Fundament i materiały
Technika opiera się na istnieniu różnych gęstości jaj, pasożytów, cyst, larw i detrytusów, przy użyciu roztworów siarczanu cynku jako metody flotacji.
Technika ta polega na zmieszaniu próbki z roztworem siarczanu cynku, który ma większą gęstość niż jaśniejsze jaja, larwy lub pasożyty.
Umożliwia to wytrącanie się cięższych pierwiastków i unoszenie się lżejszych pierwiastków, które pojawiają się w supernatancie po odwirowaniu próbek.
materiały

Pojemniki do pobierania próbek kału (źródło: Bobjgalindo za pośrednictwem Wikimedia Commons)
- Przygotować roztwór siarczanu cynku o gęstości 1,18 lub 1,2 g / ml, jeśli próbka została wcześniej poddana obróbce.
- Przygotuj stojak z uprzednio opisanymi probówkami.
- Mieć maszynę odśrodkową.
- Przygotować szkiełka mikroskopowe i szkiełka nakrywkowe. Wszystkie muszą być oznaczone
- Upewnij się, że dostępny jest płyn Lugola do zabrudzenia prześcieradeł.
- Miej gazę do przefiltrowania.
- Miej lejki i wodę destylowaną.
- Zlokalizuj oznakowane plastikowe lub kartonowe pojemniki.
- Również aplikatory i sterylny uchwyt 5 mm.
- Zapalniczka do sterylizacji rękojeści.
Kroki
Badanie makroskopowe i mikroskopowe
W przypadku każdego badania kału badanie rozpoczyna się tak zwanym „badaniem ogólnym” próbek.
Opisano konsystencję, kolor, obecność czegoś, co wydaje się być krwią, obecność śluzu i obecność dorosłych pasożytów.
Następnie przystępujemy do „badania mikroskopowego” stolca, zależy to od metody. Najprostsza to metoda bezpośredniego rozmazu, która jest najprostszą metodą obserwacji mikroskopowej pasożytów.

Zdjęcie obserwacji Gardia lamblia, pasożyta jelitowego (źródło: Riddlemaster za Wikimedia Commons)
Procedura polega na umieszczeniu niewielkiej ilości próbki bezpośrednio na szkiełku. Umieść kilka kropli roztworu soli, który powinien mieć zbliżoną wielkość do próbki. Wymieszaj roztwór soli ze stolcem, aż utworzy się jednorodna mieszanina. Umieścić szkiełko nakrywkowe i zbadać pod mikroskopem.
Oryginalna technika Fausta
Druga procedura składa się z metody float Fausta, której oryginalna wersja składa się z:
1- W tym celu umieść około dwóch gramów kału w odpowiednim pojemniku.
2- Dodać 30 ml roztworu flotacyjnego siarczanu cynku, z którego sporządza się emulsję, mieszając roztwór z kałem.
3- Przecedzić metalowym sitkiem do drugiego pojemnika i przenieść do probówki.
4- Dodawać więcej roztworu flotacyjnego, aż w probówce utworzy się menisk.
5- Umieścić szkiełko nakrywkowe na menisku. Odczekaj 10 do 15 minut.
6- Wyjąć szkiełko nakrywkowe i umieścić je na szkiełku, które zostanie zbadane pod mikroskopem.
Technika Fausta przez wirowanie
Początkowo metoda nie wykorzystywała wirowania, jednak teraz jest ona uwzględniona, ponieważ uzyskuje się lepsze wyniki. Technika obejmuje szereg kroków prowadzących do prawidłowego zabiegu, są to następujące:
1- Odchody przemywa się wodą, dobrze miesza, a następnie filtruje za pomocą gazy złożonej na cztery części. Próbkę umieszcza się w probówce.
2- Odwirować i usunąć supernatant (próbki trzymane nad wodą). Kroki 1 i 2 powtarza się, aż supernatant stanie się „klarowny”.
3- Siarczan cynku jest dodawany do przefiltrowanej i odwirowanej próbki.
4- Dobrze się miesza.
5- Ponownie wirować przez 1 minutę przy 2500 obr / min (obroty na minutę).
6- Supernatant odzyskuje się sterylną pętlą o średnicy około 5 mm; probówek nie należy wstrząsać.
7- Próbkę odzyskaną z supernatantu umieszcza się na szkiełku i kroplę Lugolu można nałożyć do zabarwienia, szkiełko nakrywkowe umieszcza się i obserwuje pod mikroskopem.
8- Pojemniki i probówki są oznakowane.
Korzyść
- Elementy użyte do diagnozy są widoczne w czystości i bez „detrytusu”, co ułatwia obserwację arkusza i skraca czas diagnozy.
- W supernatancie odzyskiwane są zarówno larwy, jaja i / lub cysty.
- To bardzo tania metoda.
- Procedura jest bardzo prosta i łatwa do wykonania.
- Diagnoza jest szybka i dokładna.
- Ze względu na znaczenie i wysoką częstość występowania pasożytów w biednych krajach, te tanie i łatwe w użyciu metody są idealne do diagnostyki i monitorowania tych patologii.
Niedogodności
Gęstość roztworu flotacyjnego powoduje skurcz larw, to znaczy kurczą się i po bardzo krótkim czasie mogą się odkształcać. Zmusza to badającego do natychmiastowego postawienia diagnozy, a leczone próbki nie mogą być zatrzymane do przyszłych badań.
Podobnie jak w przypadku wszystkich metod identyfikacji mikroskopowej, do postawienia dokładnej diagnozy potrzebny jest bardzo doświadczony personel badawczy.
Szybkie odkształcenie elementów niezbędnych do diagnozy, choć stanowią oczywistą wadę, można skorygować wykonując natychmiastowe obserwacje mikroskopowe.
Bibliografia
- Ananias, Floryda (2017). Ocena czułości metody Fausta i samoistnej sedymentacji w diagnostyce lambliozy. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P. i Smith, JW (1978). Ocena porównawcza zmodyfikowanej techniki flotacji siarczanu cynku. Journal of Clinical Microbiology, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C. i Strube, C. (2016). Czułość i skuteczność wybranych metod koproskopowych - sedymentacji, kombinowanej sedymentacji i flotacji siarczanem cynku oraz metody McMastera. Badania parazytologiczne, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Diagnostyka laboratoryjna pasożytów przewodu pokarmowego. Clinical microbiology reviews, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Modyfikacja metody odśrodkowej flotacji siarczanem cynku w celu odzyskania komórek jajowych robaków pasożytniczych w formalinizowanym kale. Journal of Parasitology, 28 (4), 345–346.
