POSIEW KRWI: DO CZEGO SŁUŻY, UZASADNIENIE, PROCEDURA, WYNIKI - BIOLOGIA - 2025

Posiew krwi jest testem bakteriologicznym, którego celem jest wykrycie obecności mikroorganizmów we krwi. Krew jest z natury sterylnym płynem i dlatego musi być przechowywana w warunkach fizjologicznych, dlatego obecność bakterii lub grzybów we krwi jest zawsze patologiczna.

Gdy we krwi znajdują się bakterie lub grzyby, ale namnażanie nie przekracza eliminacji mikroorganizmów przez układ odpornościowy, nazywa się to bakteriemią (dla bakterii) lub fungemią (dla grzybów); Ale jeśli liczba mikroorganizmów wzrasta w niekontrolowany sposób, nazywa się to posocznicą.

Butelki na posiew krwi (żółte: aerobioza u dzieci, zielone: ​​aerobioza dorosłych i czerwone: beztlenowce u dorosłych). Źródło: zdjęcie autorstwa mgr Marielsy Gil.

Bakteriemia, fungemia i posocznica zagrażają życiu pacjenta i dlatego należy je natychmiast leczyć. Dlatego, gdy istnieje podejrzenie zakażenia krwi, lekarze proszą o wykonanie badania posiewu krwi.

Ta analiza bakteriologiczna pozwala stwierdzić, czy we krwi występuje infekcja i który mikroorganizm dotyczy. Ponadto, jeśli wynik jest pozytywny, przeprowadza się test wrażliwości, aby dowiedzieć się, jaki antybiotyk lub środek przeciwgrzybiczy można zastosować w leczeniu.

Z drugiej strony, jeśli posiew krwi jest ujemny po 24 godzinach inkubacji, nie należy go wyrzucać, dopóki nie będzie ujemny przez 240 godzin. Gwarantuje to, że nie ma wolno rosnących mikroorganizmów.

Aby posiew krwi był wiarygodny, podczas pobierania próbki należy zastosować ekstremalne środki aseptyczne, a w celu zwiększenia wiarygodności i czułości testu należy pobrać co najmniej dwie próbki w trakcie lub w pobliżu szczytu gorączki.

Po co to jest?

Krew jest jałową cieczą, a gdy znajdują się w niej mikroorganizmy, jest w 100% patologiczna. Ta sytuacja przedstawia bardzo delikatny obraz kliniczny, który zagraża życiu pacjenta.

Posiew krwi jest ważnym testem bakteriologicznym, który wykrywa obecność mikroorganizmów w krwiobiegu.

Mikroorganizmy mogą przedostawać się do krwi różnymi drogami, którymi mogą być między innymi infekcje pozanaczyniowe, takie jak: zapalenie płuc, infekcje wewnątrzbrzuszne, odmiedniczkowe zapalenie nerek, poważne infekcje skóry, tkanek miękkich czy artretyzm.

Lub może to być również dożylnie, na przykład zakażenie cewników dożylnych lub tętniczych, zapalenie wsierdzia, dożylne uzależnienie od narkotyków, podanie skażonych leków lub roztworów itp.

Wykrywanie i leczenie czynnika wywołującego posocznicę w odpowiednim czasie ma zasadnicze znaczenie dla przeżycia pacjenta.

W tym sensie lekarz powinien wskazać na wykonanie posiewu krwi, gdy obserwuje oznaki i objawy, które pozwalają podejrzewać posocznicę, takie jak: gorączka (powyżej 38 ° C) bez widocznego ogniska zakaźnego lub przeciwnie, hipotermia (<de 36 ° C).

Innymi objawami mogą być: dreszcze, zwiększenie liczby białych krwinek (> 10 000 komórek / mm ³ ) lub istotne zmniejszenie liczby komórek polimorfojądrowych (<1000 PMN / mm ³ ). A także nagłe pogorszenie stanu zdrowia lub utrata witalności wielonarządowej, wśród innych znaków ostrzegawczych.

Bakteremia może być stała, przejściowa lub przerywana. Jest to ważne przy pobieraniu próbki, ponieważ jest to konieczne, gdy istnieje większe prawdopodobieństwo wykrycia krążącego mikroorganizmu.

Dlatego zaleca się pobranie co najmniej 2 próbek w różnych miejscach. Ponadto w idealnym przypadku próbka jest pobierana w szczytowych temperaturach lub gdy u pacjenta występują dreszcze, skrajna hipotermia, pocenie się lub tachykardia.

Jednak aby posiew krwi był naprawdę użytecznym narzędziem, próbkę należy pobrać z najwyższą ostrożnością. Zła manipulacja lub zła aseptyka w momencie pobierania próbki może spowodować unieważnienie testu i uzyskanie fałszywie pozytywnych wyników.

Podstawa

Badanie polega na aseptycznym pobraniu dwóch lub trzech próbek krwi i umieszczeniu jej w specjalnych butelkach.

Specjalne urządzenia do hodowli próbek krwi nazywane są butelkami do posiewów krwi. Są one podzielone na:

W zależności od wieku pacjenta

-Zastosowanie pediatryczne

-Dla dorosłych.

Zgodnie z rodzajem mikroorganizmu

- Kolby do mikroorganizmów tlenowych (bakterie tlenowe, bakterie fakultatywne i grzyby).

-Butelki do hodowli krwi dla mikroorganizmów beztlenowych (bakterie ścisłe beztlenowe).

Niektóre zawierają pożywkę płynną, a inne zawierają jednocześnie pożywkę stałą i płynną. Występują również z cząsteczkami węgla aktywnego.

Proces

Zalecenia dotyczące pobierania próbek

- Próbka do pobrania przez wysoce wyszkolony i przeszkolony personel z zakresu mikrobiologii.

- Asepsa, czyli dokładne oczyszczenie miejsca pobierania próbek jest niewątpliwie najważniejszym krokiem.

- Podobnie jak w przypadku każdego pobierania próbek, personel medyczny musi w pełni przestrzegać środków bezpieczeństwa biologicznego podczas procesu (między innymi używanie rękawiczek, fartucha, okularów).

- Upewnij się, że dostępne są wszystkie niezbędne narzędzia do pobierania próbek.

- Oznaczyć fiolki pełnym imieniem i nazwiskiem pacjenta, datą, numerem dokumentacji medycznej, czasem pobrania próbki i numerem kolejnym laboratorium.

- Idealnie jest pobrać próbkę przed rozpoczęciem przez pacjenta terapii przeciwbakteryjnej. Wskazuje się to tylko w przypadku podejrzenia niedziałania trwającego leczenia. W takim przypadku próbkę należy pobrać przed zmianą leku, używając butelek na posiew krwi z inhibitorami antybiotyków (cząsteczki węgla aktywnego).

- Należy pobrać co najmniej 2 próbki z różnych miejsc anatomicznych, takich jak prawe ramię i lewe ramię. W przypadku podejrzenia zapalenia wsierdzia zalecane są 3 próbki. Do każdej próbki będą dołączone dwie butelki (jedna na aerobiozę i jedna na beztlenową).

Ilość próbki

Ilość próbki różni się w zależności od wieku pacjenta, ale stosunek 1: 5 do 1:10 powinien być zawsze utrzymywany w odniesieniu do rozcieńczenia krwi / bulionu hodowlanego.

U noworodków zalecana ilość próbki to 1 ml krwi na fiolkę. Używana jest butelka pediatryczna.

W przypadku niemowląt w wieku od 1 miesiąca do 1 roku można ją zwiększyć do 1,5 ml krwi na butelkę. Używana jest butelka pediatryczna.

U dzieci w wieku powyżej 2 lat odpowiednia ilość próbki to 2,5 ml krwi na fiolkę. Używana jest butelka pediatryczna.

Od okresu dojrzewania można ją zwiększyć do objętości krwi od 5 do 10 ml na butelkę. Używana jest butelka dla dorosłych.

Wreszcie w fazie dorosłej potrzebna ilość to 8-10 ml na butelkę. Używana jest butelka dla dorosłych.

Próbowanie

- Próbka krwi może być żylna lub tętnicza. Jednak krew tętniczą pobiera się tylko wtedy, gdy pobieranie próbek żylnych jest niemożliwe.

- Nie zaleca się pobierania próbki z centralnego cewnika dożylnego, chyba że:

1. Niemożliwe jest pobranie próbki obwodowo (żylnej lub tętniczej).
2. Pacjenci zagrożeni krwawieniem.
3. Gdy lekarz podejrzewa bakteriemię z powodu zanieczyszczenia centralnego cewnika żylnego.
4. Gdy gorączka pojawia się ponownie po ustąpieniu gorączki trwającej od 4 do 5 dni, niezależnie od tego, czy pacjent jest leczony przeciwbakteryjnie.

Asepsa przed próbkowaniem

- Wybierz miejsca anatomiczne do pobrania. Generalnie wybiera się żyły o najlepszym kalibrze (żyłę bazylikową lub głowową).

- Według Centers for Disease Control (CDC) w Atlancie (USA), poza założeniem rękawiczek, operator musi umyć ręce 2% chlorheksydyną lub 10% jodem powidonu.

-Palpate i zlokalizuj żyłę, która ma być użyta.

-Oczyść miejsce nakłucia ruchem obrotowym, wykonując ruchy od środka na zewnątrz za pomocą mydła chlorheksydyny lub mydła antyseptycznego. Spłucz sterylną solanką.

Następnie zastosuj środek antyseptyczny i pozwól mu działać. Przykład: glukonian chlorheksydyny 0,5% przez 1 minutę lub jod powidonu 10% przez 2 minuty. W tym drugim przypadku najpierw zapytaj, czy pacjent jest uczulony na jod. Jeśli jesteś uczulony, możesz zastąpić 70% alkohol.

Ekstrakcja próbek

- Załóż opaskę uciskową, aby zaostrzyć przepływ krwi i wykiełkować żyłę.

- Nie dotykaj ponownie miejsca nakłucia palcem. Jeśli jest to bezwzględnie konieczne, palec należy umyć w taki sam sposób, jak miejsce nakłucia.

-Włóż igłę wstrzykiwacza lub skórę głowy do żyły i pobierz niezbędną ilość krwi.

-Nie nakładaj bawełny ani gazy na igłę podczas jej wyjmowania, jeśli nie jest jałowa.

-Usuń plombę z butelek bardzo ostrożnie i nie dotykając nakrętki. Niektórzy autorzy zalecają wykonanie dezynfekcji nasadki przed zaszczepieniem próbki.

- Rozprowadzić odpowiednią ilość krwi do fiolek. Jeżeli próbkę pobiera się za pomocą iniektora, niezbędną ilość najpierw wlewa się do kolby beztlenowej, a następnie do kolby tlenowej. Jeśli pobieranie odbywa się za pomocą skóry głowy (motyla), nalewane jest w odwrotny sposób.

- Delikatnie wymieszać butelkę na posiew krwi przez odwrócenie.

- Zmień rękawiczki i powtórz poprzednie kroki przy drugim pobraniu próbki.

-Jeśli druga próbka jest pobierana z innego miejsca, można to zrobić natychmiast, ale jeśli pochodzi z tego samego miejsca, należy odczekać 30 do 90 minut między jedną próbką a drugą.

- Próbkę należy jak najszybciej zabrać do laboratorium, jeśli nie jest to możliwe, należy ją pozostawić w temperaturze pokojowej do 18 godzin.

Kultura

Po znalezieniu się w laboratorium kolby inkubuje się w temperaturze 37 ° C w warunkach panujących w każdej kolbie, tj. Odpowiednio w aerobiozie i beztlenowej.

W metodzie ręcznej dzwonienie należy rozpoczynać po 24 godzinach inkubacji, a następnie dzwonić co dzień. Krążki wykonuje się w następujący sposób: najpierw dezynfekuje się zakrętkę butelki i wprowadza igłę sterylnego wstrzykiwacza. Z kolby pobiera się płyn i wysiewa na agarze z krwią i agarem czekoladowym.

W przypadku wzrostu wykonuje się Grama, subkultury w określonych pożywkach, testy biochemiczne i antybiogram.

W metodach zautomatyzowanych urządzenie Bact / Alert emituje alarm, gdy wykryje, że fiolka jest pozytywna. W ten sam sposób należy wklepać go w agar z krwią i agar czekoladowy.

Inną metodą, która zyskuje na popularności, jest analiza kolby po 6 godzinach inkubacji za pomocą spektrometrii mas. Ta metoda pomogła zwiększyć czułość i szybkość diagnozy.

Wyniki

Dopóki butelka na posiew krwi jest ujemna, lekarzowi prowadzącemu można przedstawić wstępne raporty pośrednie. Raport wskazuje, że jest ujemny w godzinach inkubacji. Na przykład, jeśli wynik będzie ujemny do czwartego dnia, zostanie zgłoszony w następujący sposób:

Wynik wstępny: ujemna hodowla po 96 godzinach inkubacji.

Uwaga: nauka trwa 240 godzin.

Jeśli posiew krwi jest dodatni, lekarz prowadzący jest natychmiast informowany i przesyłany jest raport zawierający co najmniej gram rodziny. Przykład:

Wynik wstępny: w hodowli dodatniej po 48 godzinach inkubacji obserwuje się pałeczki Gram-ujemne i oksydazę ujemną. Trwają testy identyfikacyjne i wrażliwości.

Informacje te prowadzą lekarza prowadzącego do rozpoczęcia terapii empirycznej w kierunku możliwego mikroorganizmu, czekając na ostateczny wynik laboratorium.

Po zakończeniu badania bakteriologicznego, czyli zidentyfikowaniu drobnoustroju i udostępnieniu antybiogramu, należy jak najszybciej przesłać raport końcowy.

Szczególną ostrożność należy zachować, jeśli organizmem docelowym jest Neisseria gonorrhoeae lub Neisseria meningitidis, ponieważ bakterie te są hamowane w obecności wysokich stężeń polianetosulfonianu sodu (SPS).

Dlatego ten związek nie powinien przekraczać 0,025% w butelkach na posiew krwi.

Z drugiej strony, jeśli próbka posiewu krwi jest najpierw pobierana do probówek Vacutainer, probówki te mają stężenie SPS toksyczne dla meningokoków i gonokoków, więc krew musi zostać przeniesiona w ciągu 1 godziny do systemu hodowli bulionu.

Jak stwierdzić, czy posiew krwi jest dodatni, czy zakażony

Posiew krwi jest uważany za zakażony, gdy tylko w jednej fiolce na posiew krwi występuje wzrost z całej pobranej. Podejrzenie zakażenia wzrasta, jeśli wyizolowanym mikroorganizmem jest normalna mikroflora skóry: np. Między innymi koagulazo-ujemne Staphylococcus, Propionibacterium spp.

Jednak u pacjentów z obniżoną odpornością nie należy lekceważyć żadnego drobnoustroju, ale w tym przypadku mikroorganizm powinien pojawić się w kilku próbkach.

Z drugiej strony, jeśli wrażliwość na antybiotyki tego samego mikroorganizmu wyizolowanego w dwóch różnych próbkach jest taka sama, infekcja jest prawdziwa.

Inną cechą charakterystyczną jest obciążenie bakteryjne, ponieważ zakażone posiewy krwi rosną późno, podczas gdy rzeczywiste infekcje u nieleczonych pacjentów są na ogół pozytywne po 14 godzinach inkubacji, gdy mikroorganizm nie jest uciążliwy.

Z drugiej strony, u pacjentów leczonych środkami przeciwdrobnoustrojowymi rozwój mikroorganizmu może zająć trochę czasu, ponieważ obciążenie jest bardzo niskie.

Pojawienie się więcej niż jednego mikroorganizmu może sugerować zakażenie, ale jeśli ten sam wynik zostanie powtórzony w kilku ujęciach z różnych miejsc, to jest prawdziwy.

Bibliografia

1. "Kultura krwi." Wikipedia, wolna encyklopedia. 3 lipca 2019, 17:28 UTC. 14 lipca 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Nowe technologie w diagnostyce mikrobiologicznej: automatyzacja i niektóre zastosowania w identyfikacji drobnoustrojów i badaniu wrażliwości. Rev. Med. Clin. Liczy. 2015; 26 (6) 753-763. Dostępne pod adresem: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Rozdział 20: Sepsa i ryzyko chorób sercowo-naczyniowych. Zdrowie układu sercowo-naczyniowego. str. 187-194. Dostępne pod adresem: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Kultury krwi: Co ci powiedzieli i co robisz? Chory glob. 2012; 11 (26): 146-163. Dostępne pod adresem: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Prawdopodobieństwo pomyślnego uzyskania dodatniego posiewu krwi. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Dostępne pod adresem: scielo.org